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Theses

Caractérisation de transporteurs membranaires de Plasmodium falciparum en tant que potentiel cibles thérapeutiques

Résumé : La découverte de nouveaux agents antipaludiques est primordiale. A travers le monde, les chercheurs se sont focalisés sur plusieurs stratégies. Les plus développées sont : soit les tests de molécules issues de bibliothèques chimiques dans une recherche phénotypique (comme le test direct d’agents sur des cultures de parasites in vitro), soit la recherche de nouvelles molécules agissant sur l’activité d’une cible ou d’une voie spécifique et essentielle. Cette thèse est centrée sur le second type d’approche. Nous nous sommes intéressés aux transporteurs membranaires de P. falciparum. Pour cela, nous exprimons les protéines d’intérêt dans la levure et nous les purifions. Nous optimisons les tests fonctionnels, dans le but de : a) déterminer l’effet des molécules sur les cibles spécifiques ; b) tester leur effet sur les cultures d’érythrocytes infectés par P. falciparum in vitro ; c) vérifier leur toxicité sur des cellules de mammifères ; et d) réaliser le test des molécules les plus efficaces in vivo dans un modèle de paludisme murin. Notre travail actuel est focalisé sur l’ATPase6 de P. falciparum (PfATP6) et l’adénylate translocase (PfAdT), deux protéines membranaires essentielles localisées respectivement sur le réticulum endoplasmique et la membrane mitochondriale. Nous exprimons de manière hétérologue PfATP6 dans les membranes de levure, nous purifions la protéine et mesurons une activité ATPase spécifique. Nous avons ainsi pu tester une bibliothèque chimique importante et identifier des inhibiteurs spécifiques. Ces derniers ont ensuite été testés pour évaluer leur effet sur les stades érythrocytaires du parasite in vitro et leur cytotoxicité sur des cellules de mammifères. Pour le transporteur PfAdT, nous procédons comme pour PfATP6, mais nous avons choisi un autre type de test fonctionnel dans lequel la protéine est directement exprimée sur la membrane plasmique d’E. coli. Cela devrait permettre de mesurer le transport d’ATP radiomarqué, et l’identification d’inhibiteurs spécifiques dont les effets pourront être évalués sur des cultures de parasites in vitro et dans des essais de cytotoxicité.
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https://tel.archives-ouvertes.fr/tel-01127522
Contributor : Abes Star :  Contact
Submitted on : Saturday, March 7, 2015 - 3:10:01 AM
Last modification on : Friday, June 5, 2020 - 3:04:47 AM
Document(s) archivé(s) le : Monday, June 8, 2015 - 3:30:55 PM

Identifiers

  • HAL Id : tel-01127522, version 1

Collections

STAR | CNRS | CEA

Citation

Stéphanie Bosne. Caractérisation de transporteurs membranaires de Plasmodium falciparum en tant que potentiel cibles thérapeutiques. Parasitologie. Université Paris Sud - Paris XI, 2014. Français. ⟨NNT : 2014PA11T052⟩. ⟨tel-01127522⟩

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